Guanidinethiocyanaat 593-84-0 vergemakkelijkt de extractie van nucleotiden en peptiden uit dierlijke ingewanden

Guanidinethiocyanaat | 593-84-0 | is een sterk eiwit denaturerend middel. Het is een wit kristallijn poeder, irriterend en gevoelig voor licht. Het is oplosbaar in ethanol en water, met een smeltpunt van 118℃. Guanidinethiocyanaat wordt voornamelijk gebruikt voor denaturatie, lysis van cellen en extractie van RNA en DNA. Het is een veel voorkomende chemische component voor nucleïnezuurextractie.

Octrooi cn111500664a beschrijft een werkwijze voor het extraheren van nucleotiden en polypeptiden uit dierlijke ingewanden met gebruikmaking van guanidinethiocyanaat. Nucleotiden zijn verbindingen die zijn samengesteld uit purinebase of pyrimidinebase, ribose of deoxyribose en fosforzuur, die veel worden gebruikt in de geneeskunde, moeder- en kindproducten, specerijen en levensmiddelenadditieven. Polypeptide is ±- Verbindingen gevormd door aminozuren die aan elkaar zijn verbonden door peptidebindingen zijn tussenproducten van eiwithydrolyse, waarbij verschillende gebieden van menselijke hormonen, zenuwen, celgroei en reproductie betrokken zijn. Hun belang ligt in het reguleren van de fysiologische functies van verschillende systemen en cellen in het lichaam, het activeren van relevante enzymen in het lichaam, het bevorderen van de permeabiliteit van het intermediaire metabolische membraan, of het beheersen van DNA-transcriptie of het beïnvloeden van specifieke eiwitsynthese, uiteindelijk produceren specifieke fysiologische effecten.

Dierlijke ingewanden zijn rijk aan nucleotiden en peptiden, maar momenteel wordt de extractie van nucleotiden en peptiden meestal afzonderlijk uitgevoerd, wat resulteert in verspilling van middelen en complexe processen. Guanidinethiocyanaat is nuttig om nucleotiden en peptiden uit dierlijke ingewanden te extraheren. De specifieke methoden zijn als volgt:

Was eerst de ingewanden van verse dieren, laat ze uitlekken, hak ze fijn, pureer ze, voeg gedeïoniseerd water toe om de gemengde oplossing te verkrijgen, voeg dan guanidinethiocyanaatoplossing toe aan de gemengde oplossing, tril en meng goed, en laat dan staan. Vervolgens wordt er een drager met silica aan toegevoegd, omdat guanidinethiocyanaat de cellen zal splitsen, en de nucleotiden die vrijkomen uit de cellen zullen worden gecombineerd met de silicadrager. Verwijder de drager die silica bevat, absorbeer en scheid het met eluens om gezuiverde nucleotiden te verkrijgen.

Vervolgens wordt NaCl-oplossing toegevoegd aan de resterende oplossing waaruit de silicadrager is verwijderd, de gemengde oplossing wordt geëxtraheerd, vervolgens wordt composietprotease toegevoegd, vervolgens wordt microgolf-enzymatische hydrolyse uitgevoerd, wordt de enzymatische hydrolyse-oplossing verwarmd in een waterbad , gecentrifugeerd, het supernatant wordt genomen en het polypeptide wordt verkregen na vriesdrogen.

Deze methode maakt gebruik van de eigenschappen dat guanidinethiocyanaat de celstructuur kan vernietigen en het eiwit kan denatureren. Het kan niet alleen nucleotiden en peptiden achtereenvolgens extraheren, maar heeft ook de voordelen van een eenvoudige methode en hoge efficiëntie. Tegelijkertijd vermijdt het ook het probleem van reactie tussen biochemische reagentia bij het toevoegen van biochemische reagentia voor extractie.